《临床检验实验》教学大纲(2018年春)

发布时间:2018-01-30 11:14

临床检验实验》教学大纲

卫生检验专业用

四川大学华西公共卫生学院

卫生检验与检疫系编20180124

一、课程基本信息

课程名称:临床检验实验Clinical Laboratory Techniques (Experimental Course)

课程号(代码):504212015

课程类别:专业课程

学时:36                        学分:1.5

二、实验的地位、作用和目的

临床检验是卫生检验专业学生在学习医学微生物与医学免疫学的基础上学习的一门重要专业课,为该专业的必修课。临床检验实验是跟临床检验理论课配套的实验课程,开设了血红蛋白测定、血细胞计数、白细胞分类计数、尿糖和尿蛋白定性检测、血清总蛋白测定、血糖测定、血清尿素测定、血清ALT活性测定,以及临床检验室参观实习等实验内容。通过课程学习,使学生掌握各实验原理以及临床意义,明确实验注意事项,熟悉相应实验操作,为学生更好地理解理论知识,联系理论与实践起到积极作用。

三、基本原理及课程简介

依据临床实验室诊断相关项目,开设涵盖血液学检测、体液检测、重要酶活性检测等实验项目,主要依据的实验原理包括手工计数法、显微镜观察法、化学反应法、分光光度法等。同时,安排学生到附四院检验科参观学习一次,使学生对医院检验科的布局有一定的感性认识,并了解各种现代化检验仪器的基本操作,熟悉医院检验科的日常工作流程,知悉学习临床医学检验的重要性,提高学习的兴趣。

四、实验方式及基本要求

实验方式为训练(具体操作)和参观。为必修实验课,要求熟练掌握。

由带习教师讲解后,学生(分组)自主动手完成全部实验内容。

五、实验报告

在报告中要求明确试验目的、原理、方法及操作步骤,试验结果、结论、讨论等。

六、考核与考试

本实验课程以考核方法对学生进行检查,考核内容包括实验报告、实验操作、实习态度。其中实验报告50%,平时作业30%,课堂态度与积极10%,平时出勤10%

七、基本设备与器材配置(名称及数量)

电子天平 3台,生物显微镜 40台,722光栅分光光度计  3台,S500P半自动生化仪  1台,恒温水浴箱  3台,电子天平/FA1604S  1台,全自动血球计数仪  1台,全自动生化仪  1台,紫外可见分光光度计 2台。

八、实验项目及内容提要

1. 血红蛋白测定

指尖采血,取血于血红蛋白转化液中,血红蛋白与其中的高铁氰化钾反应形成高铁血红蛋白,在和氰结合生成红棕色的氰化高铁血红蛋白,测定540nm的吸光度值,采用摩尔消光系数法或标准比较法定量。练习熟练掌握指尖采血,取血于血红蛋白转化液中混匀后比色,计算。

2. 血细胞计数

指尖采血,取血于相应的稀释液中稀释后,加样于血球计数板上,显微镜下计数各种相应血细胞(血小板)的数量,按照稀释倍数计算原血中的血细胞数量。主要要求掌握血球稀释计数的原理、血球计数板的结构及应用。

2. 白细胞分类计数

指尖采血,取血制作血涂片,经染色、干燥后,显微镜下(油镜)观察计数各种白细胞,计算各种白细胞所占的百分比。

本实验要求主要掌握血涂片的制作、染色方法及各种白细胞形态识别。

4. 尿化学测定

含有醛基的葡萄糖,在高热及碱性溶液中,能将溶液中蓝色的硫酸铜还原为氧化亚铜,出现黄色至砖红色沉淀物。

加热可使蛋白质变性凝固,加酸可使尿液pH接近蛋白质等电点,促使蛋白质沉淀和溶解碱性盐沉淀物。

本实验操作包括采样,加热,滴加试剂,观察结果。

5. 血清总蛋白的测定

蛋白质与双缩脲试剂反应生成紫红色络合物,测定530nm的吸光度值,采用已知浓度的血清蛋白标准,进行系列稀释后同法反应,测定,制作标准曲线,查表,计算。

6. 血糖测定

样品中的血糖经葡萄糖氧化酶(GOD)氧化为葡萄糖酸,并释放过氧化氢。生成的过氧化氢经过氧化物酶(POD)分解,并使色原性受体4-氨基安替比林和酚缩合成为红色的醌类化合物。醌类化合物的产量与样品中葡萄糖含量成正比,可以采用标准比较法或标准曲线法定量。

7. 血中尿素测定

样品中尿素在尿素酶催化下水解生成氨和二氧化碳。氨在α-酮戊二酸和NADH存在下经谷氨酸脱氢酶催化生成谷氨酸,同时NADH转变为NAD340nm吸光度值下降,利用自动分析仪监测下降速率,计算尿素含量。

8. 血清ALT活性测定

ALT催化丙氨酸和α-酮戊二酸反应生成丙酮酸和谷氨酸,中止反应后加2,4-二硝基苯肼反应后显色,500nm比色。单位时间内生成的颜色与ALT的活力成正比。采用标准曲线定量。

9. 临床检验仪器使用(见习)

分组参观华西第四医院检验科,由检验科老师讲解检验科工作流程,介绍检验科常用仪器,重点介绍全自动生化分析仪、血球分析仪。


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